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新到手的c18色譜柱不要著急使用,先做好其活化工作

發布時間:2020-08-17        閱讀:5294
  c18色譜柱具有大的孔徑,可用純水作為流動相,因此,該色譜柱是測定和分析天然和合成多肽以及小分子蛋白質的理想色譜柱。特殊化學鍵合技術形成單層ODS,在純水溶液中不會崩解。
 

  c18色譜柱的活化:
  由于色譜柱由生產廠家實驗室測試完畢密封好后到達您的手中可能經過了一段時間,因此必須對您剛拿到手的柱子進行活化處理:首先,配好65%C2H3N/水或者CH3OH溶劑備用,所有進入HPLC儀器的溶劑必須經過0.2um或者0.45um過濾膜過濾并脫氣;再按柱子的正確方向連接柱子進口端(連接時注意一定要把管路的端口抵緊柱子的進口以免產生死空間發生漩渦效應降低柱效), 出口端先不接檢測器。先以0.1~-0.2ml/min的流速沖洗,等看到有液體從柱子中流出后,持續10mins之后再接上檢測器,以循序漸進方式將流速調至1.0ml/min(LC/MS柱子應以0.2ml/min的流速進行),繼續活化2小時。
 
  c18色譜柱硅膠填料:
  c18色譜柱采用球形, 高純度(金屬雜質<10 ppm)硅膠為填料,孔徑120?,粒徑有1.8、2.2、3、5和10 μm,孔體積1.0 mL/g,比表面積350 m2/g,單層全封尾,碳載量19.5%。c18色譜柱特別為各種堿性化合物的分離而設計,pH耐受范圍1.5-10.5;
  硅膠:球形,高純度(金屬雜質<10ppm)孔徑:120? 粒徑:1.8、2.2、3、5和10μm;
  孔體積:1.0mL/g 比表面積:350m2/g 固定相結構:單層全封尾 碳載量:19.5%。

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